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標題Title: 探討Pasteurella multocida外膜蛋白PM1992作為次單位疫苗之可能性
作者Authors: 495H0037黃晟豪、495H0017劉耿宏、495H0007楊偉辰、495H0065林家慶、495H0038游亞聖
上傳單位Department: 生物科技系
上傳時間Date: 2010-6-30
上傳者Author: 陳怡玲
審核單位Department: 生物科技系
指導教師Teacher: 吳定峰
檔案類型Categories: 畢業論文
關鍵詞Keyword: Pasteurella multocida、HPLC、MASS、單位疫苗
摘要Abstract: Pasteurella multocida是革蘭氏陰性桿菌,會造成豬鼻萎縮性鼻炎及敗血症。目前抗豬鼻萎縮性鼻炎的疫苗包括降低毒性的活毒菌及死毒菌細胞,能夠給予活體堤供有限的保護。在此研究中,我們試著找出細胞外膜上可能的具有潛力製成次單位疫苗的抗原。二維電泳點上附著的血清,則是利用福馬琳處理過的細菌,注射至老鼠活體內,尋找可能存在巴斯德桿菌外膜上的抗原。西方墨點法證實23個蛋白質能夠和血清產生交互作用力。而此23個蛋白質更進一步用HPLC及MASS被鑑定出。而這23個蛋白質中的其中之ㄧ被命名為—Putative uncharacterized protein PM1992,為外膜蛋白。及其他被鑑定涉及生化代謝的蛋白質。由於PM1992存在外膜的位置及功能皆不明確,故我們假定PM1992可能是次單位疫苗。因此,我們將PM1992基因轉入pPAL7的原核質體進行蛋白質的表現,並且利用Profinity eXact™ Protein Purification System (Bio-Rad)進行純化。西方墨點法的實驗結果顯示,純化後的PM1992能被經老鼠誘導後的血清所辨識,表示PM1992具有潛力成為次單位疫苗。

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2010_6_ca96f0c4.doc 164Kb doc 280 168
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